一，固体发酵
固体发酵有曲盘加盖发酵、大床发酵、塑料发酵等多种方式。固体发酵等多种方式。固体发酵又称固态发酵，是指微生物在没有或几乎没有游离水的固态培养基上的发酵过程。固态的湿培养基一般含水量在50%左右，而无游离水流出，此培养基通常是手握成团、落地即散，所以此发酵也可称为半固体发酵。所用原料一般为经济易得、富含营养物质的工农业生产中的副产品和费产品，如麸皮、薯粉、大豆饼粉、高粱粉、玉米粉等。根据需要，有的还对原料进行粉碎蒸煮等预加工，有的还需加入尿素、硫酸铵及一些无机酸碱辅料等，厌氧固体发酵生产简易，一般采用窖池堆积压紧密封进行。好氧菌的固体发酵可以将接种后的培养基摊开铺在容器表面，静置发酵，也可通气和翻动，使之能迅速获得氧和三区发酵产生的热。这里主要介绍曲盘加盖发酵。培养基配方：麸皮30%，米糠30%，玉米芯30%，玉米粉蒸汽灭菌30~40min，或间歇灭菌。灭菌的固体发酵培养基趁热放入发酵室，先将料搓碎，冷却至30度左右接种，搅拌均匀，接种量30%左右。然后在曲盘中将料铺平，上盖塑料薄膜，将曲盘放在曲架上，以便凝结水能沿盖滴到曲盘底上所填的纱布内。发酵培养分前、中、后三期，初始培养温度以26度为宜，经36h左右，培养基上会长出致密的菌丝，3~5d左右由于菌丝生长旺盛，品温上升很快，必须注意及时降温，控制品温在28度左右。否则影响菌体正常生长，易长杂菌。第6天，控制室温26度左右。发酵菌丝成片，料为50%~60%。发酵结束时，应控制在20%~40%。镜检观测菌体的形态，密度，要求芽孢菌发酵结束时芽孢形成率》=80%；检测发酵液中还原糖、总糖、氨基酸、ph值、溶解氧浓度。光密度基黏度等理化参数；检测发酵过程中摄氧率、co2产生率、呼吸率、氧传递系数等发酵代谢特征参数；固体发酵中物料的颜色、形态、气味、含水量等变化作为发酵终点判断。对于发酵物直接分装的产品剂型，可根据产品要求进行包装。建立生产档案。每批产品的生产 、检验结果应记录存档。包括检验项目、检验结果、检验人、批准人、检验日期等信息。产品质量跟踪，定期检测产品质量，并对产品建立应用档案，跟踪产品的应用情况。
二，液体深层发酵
微生物肥料的液体深层发酵的工艺流程如下：砂管菌种->斜面菌种->种子罐->填充剂吸附->喷雾干燥制粉->成品检查->包装。
1，斜面菌种的培养
将保存在砂土管中的纯种转移到斜面上进行培养。斜面培养基可采用淀粉硝酸盐培养基或马铃薯葡萄糖培养。
2，种子扩大培养
通常采用种子罐培养。液体培养基、补料罐、管道、发酵设备及空气过滤系统灭菌温度为121~125度，灭菌时间为0.5~1.0h。液体培养基装料量为50%~75%发酵罐容积。培养基的重要原料需经过摇瓶试验或小型发酵罐试验后方可用于发酵生产。种子培养基要保证菌种生长延滞期短，生长旺盛。原料应使用易被菌体吸收利用的碳、氮源，且氮源比例较高，营养丰富完全，有较强的ph缓冲能力。最后一级种子培养基主要成分应接近发酵培养基。如“5406”抗生菌的生产中培养基按豆饼粉1.5%、玉米粉1.5%、硫酸铵0.25%、硫酸镁0.25%、糖化胶2%进行配制，调整ph到9.0后装入经过灭菌的种子罐，经灭菌后接种培养。接种前把2支斜面培养基是哪个的菌丝体刮入无菌水中，制成孢子悬液，在无菌条件下接入种子罐内，然后在罐温30~32度、罐压在0.1MPa、通气量1:1、搅拌速度220转每秒的条件下进行培养，培养时间为18~24h。种子培养达到一定数量时转移到发酵罐中。
3，发酵罐的生产
发酵培养基要求接种后菌体生产旺盛，在保证一定菌体密度的前提下兼顾有效代谢产物。原料应选用来源充足、价格便宜易于利用的营养物质，一般氮源比例较高培养基地。可采用对发酵培养基补料流加的方法改善培养基的营养构成以达到高产。
（1）.接种量的要求 摇瓶种子转向种子发酵罐培养的接种量为0.5%~5%；在多级发酵阶段，对生长繁殖快的菌种，从一级转向下一级转向下一级发酵的接种量5%~10%；对生长繁殖较慢的菌种，接种量不低于10%。
（2）.培养温度 发酵温度应控制在25~35度，对特殊类型的菌种应根据其特性而定。在发酵过程中，可根据菌体的生长代谢特征在不同的发酵阶段采用不同的温度。
（3）.供氧 通常采用的供养是向培养基中连续补充无菌空气，并与搅拌相配合，或者采用气升式搅拌供氧。对于好氧代谢的菌株或兼性厌氧类型菌株，培养基中的溶解氧不得低于临界氧浓度；严格厌氧类型菌株培养基的氧化还原电位不得高于其临界氧化还原电位。如5406抗生菌的生产中发酵罐培养基先按豆饼粉1.5%、酒精水20%、糖化胶2%、碳酸钙0.3%。调整ph到9.0后；然后在专门的灭菌装置中对培养基进行连续的灭菌后装入发酵后装入发酵罐；再转入具有一定浓度的种子液。在罐温30度，罐压0.1MPa.通气量18h前1:1;18h后1:1.2，搅拌速度180转每分种的条件下进行发酵，发酵时间为30~36h。（未完待续）
